聚乙二醇修飾聚氨基酸載體的構建及應用.pdf

1、大多數抗癌藥物具有溶解性差、毒副作用大的特點，其應用受到了限制。建立合適的藥物傳輸體系可以提高藥效，降低藥物的毒副作用。聚氨基酸具有良好的生物相容性和生物可降解性，廣泛用于藥物載體領域，可以增加難溶性抗癌藥物的溶解性，同時通過對氨基酸側鏈豐富的基團進行改性可以更容易將患病部位辨識，從而療效增加的同時對器官組織的損傷減小。本文以氨基酸為主要原料，合成并構建了聚乙二醇修飾的聚氨基酸嵌段共聚物膠束用于載藥，分析了聚合物膠束的物理化學性質，研究

2、了聚合物結構對載藥、釋藥性能的影響，并考察了膠束的細胞毒性和細胞攝取。
　　(1)以谷氨酸、苯丙氨酸為原料制備了相應的氨基酸-N-羧酸酐(NCA)，并通過紅外光譜(FT-IR)、核磁氫譜(1H NMR)等手段表征了氨基酸-N-羧酸酐的化學結構。利用單甲氧基聚乙二醇胺(Methoxypolyethylene glycols，mPEG)引發氨基酸-N-羧酸酐開環聚合制備了兩親性的三嵌段共聚物聚乙二醇-聚谷氨酸-聚苯丙氨酸(mPEG-P

3、LGA-PPA)，通過改變聚合物中各組分的比例合成了一組具有不同結構組成的聚合物。通過凝膠滲透色譜(GPC)測定了聚合物的分子量(Mn)和分子量分布(PDI)，FT-IR、1HNMR分析了聚合物的化學結構。并選擇環狀肽c(RGDfk)為靶向片段修飾聚合物Mal-PEG-PLGA-PPA制備了具有靶向功能的聚合物c(RGDfk)-PEG-PLGA-PPA。
　　(2)運用溶劑-反溶劑法制備了聚合物膠束，測定了膠束的臨界膠束濃度(CM

4、C)，掃描電鏡(SEM)結果表明聚合物在水中可自組裝成50～100nm的類球形膠束，而且在近中性條件下以“樹枝狀”或“迷宮狀”的形式規則排列;動態光散射(DLS)與圓二色譜(CD)結果證明膠束具有pH響應性，隨著從pH=7到pH=1變化，粒徑從135nm增加到2031nm，膠束開始出現團聚現象，電位從-40.4mV升高到12.5mV，膠束的二級結構中α螺旋的含量逐漸增加。
　　(3)以阿霉素(DOX)、紫杉醇(PTX)、索拉菲尼(

5、SFN)等抗癌藥物為模型藥物考察了聚合物的結構對載藥性能、體外釋藥性能的影響。結果表明，隨著聚合物中疏水片段比例的增加，載藥量呈現先增加后降低的趨勢。聚合物對三種藥物都有明顯的增溶緩釋效果，三種藥物的釋藥行為呈現不同的規律。其中，SFN載藥膠束的釋藥曲線呈現階梯型，緩控釋效果最為明顯;DOX載藥膠束的釋放速率較快，48h后接近完全釋藥;PTX載藥膠束的釋放曲線最緩慢，48h的累積釋藥率在20％左右;但總體上均呈現出載藥量越高，48h后累

6、積釋放率越低的釋藥規律?？疾炝瞬煌琾H條件下藥物的釋放曲線，發現釋放介質的pH值對藥物的釋放有較大的影響。分析了三種藥物的釋藥機理。
　　(4)選用HeLa細胞考察了膠束的細胞毒性和細胞攝取。結果表明，空白膠束的細胞毒性較低，具有較好的生物相容性，濃度達到1000μg/mL，癌細胞存活率仍在80％以上;不同結構的聚合物的細胞毒性不同，且SFN載藥膠束的細胞毒性較游離SFN藥物的毒性有所提高;同時載藥膠束可以快速有效的被HeLa細胞