人心肌肌鈣蛋白I（cTnI）膠體金免疫層析分析法的研究.pdf

　　目前在工業化國家，心血管疾病是威脅人類生命的主要疾病之一，發病率和死亡率均很高，對此類疾病進行早期診斷和治療具有重大意義。心由于人心肌組織難以獲得，因此從組織中大量提取純化cTnI，把它作為研究或者診斷用的抗原是極其困難的，所以本實驗采用Fmoc保護的氨基酸，用固相法人工合成多肽cTnI抗原，其特點是選擇合成天然cTnI蛋白上的一段氨基酸多肽，具有免疫原性、且水溶性好，經高效液相層析純化和質譜分析證實所合成多肽達到后續實驗的要求。同時為了加強這段多肽的免疫原性，把它和血藍蛋白(KLH)載體偶聯，用該連接物免疫家兔，采用經典的多克隆抗體制備技術制備cTnI合成多肽抗體，采用酶聯免疫吸附試驗法(ELISA)對cTnI抗體進行檢測，達到實驗要求。采用檸檬酸三鈉還原法制備金溶膠。用制備的抗體標記納米級的膠體金顆粒和包被微孔硝酸纖維素膜，并結合層析技術建立了cTnI的膠體金免疫層析分析法，獲得了滿意的結果。該方法具有較高的靈敏度和特異性。為急性心肌梗死(AMI)高危人群的普查和醫院輔助診斷AMI提供特異、靈敏、簡便、快速的診斷技術，為制備國產化cTnI試劑盒奠定了基礎。